博纳艾杰尔 Agela Technologies

客服热线:400-606-8099
高级搜索
索取报价
最近加入的产品:
购物车里共有有 0 件产品

(GB/T 22338-2008) 鱼肉中氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素的测定

应用简介

本实验重现了GB/T 22338-2008的前处理方法,采用Cleanert® Silica小柱结合液相色谱串连质谱(LC-MS/MS)对鱼肉中的氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素进行了测定。样品经乙腈提取,Cleanert® Silica小柱净化,Venusil MP C18色谱柱(3 µm,100 Å;3.0 × 50 mm)分离,采用0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相进行洗脱,LC-MS/MS进行检测,内标法定量。结果表明,当加标量为4.0 µg/kg时,回收率在70% ~ 115%之间,能够满足检测要求。

收藏

前言

氯霉素类属酰胺醇类广谱抗生素。包括氯霉素及其衍生物,主要有氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考。氯霉素有很强的毒副作用,能够导致再生障碍性贫血症,不可逆,且与使用剂量和频率无关,美国、欧盟、日本等很多国家都禁止在动物源性食品中检出。中国在2002年也把它列为违禁药物,禁止在动物食品中检出。甲砜霉素对血液系统的毒性比氯霉素小,但可以抑制人体免疫系统、红细胞和血小板的生成,除中国和日本外,欧共体和美国均禁用于食品动物。氟苯尼考虽不会引起再生障碍性贫血症,但对动物胚胎有影响。

本文通过对国标的重现,建立了鱼肉中氯霉素、氟苯尼考和甲砜霉素同时测定的分析方法。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

AB SCEIX API 4000+液相色谱串联质谱仪。

试剂材料

乙腈、正己烷、丙酮为色谱纯;实验用水为超纯水;正丙醇为分析纯;

混合标准工作溶液:氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考,甲醇溶解;

Cleanert® Silica固相萃取小柱:200 mg/3 mL。

样品制备

样品提取

称取均质好的鱼肉样品5 g置于50 mL离心管中,加入30 mL 乙腈,涡旋1 min,超声提取5 min,8000 r/min离心5 min,取全部上清液置于分液漏斗中,并向分液漏斗中加入15 mL乙腈饱和的正己烷溶液,震荡5 min,静置分层,转移乙腈层至鸡心瓶中,残渣再加入30 mL乙腈按照上述步骤液液萃取一次,合并两次提取液,向鸡心瓶中加入5 mL正丙醇,摇匀,40℃旋蒸至近干,再用氮气吹干,加入5 mL丙酮-正己烷(1+9)溶解,摇匀,待净化。

样品净化

将Cleanert® Silica小柱用5 mL丙酮/正己烷(V/V,1+9)活化平衡,将上述待净化液全部上样于小柱上,弃去流出液,再用5 mL丙酮-正己烷(V/V,6+4)洗脱小柱,收集流出液,于40℃下旋蒸至近干,用水定容至1 mL,待检测。

以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。

实验条件

色谱条件

色谱柱:Venusil MP C18, 3 µm,100 Å,3.0 × 50 mm

流动相:A相-0.1%甲酸水溶液,B相-0.1%甲酸乙腈

柱  温:30℃

进样量:5 µL

梯度洗脱条件(见表1)

表1. 液相色谱梯度洗脱条件

时间/min

流速/mL/min

A%

B%

0.0

0.4

95

5

1.0

0.4

95

5

1.1

0.4

85

15

9.5

0.4

25

75

9.6

0.4

5

95

11.5

0.4

5

95

11.6

0.4

95

5

16.0

0.4

95

5

质谱条件

离子源:ESI-;电喷雾电压:-4500 V;雾化气压力: 50 psi;气帘气压力:10 psi;辅助气压力:60 psi;离子源温度:550℃;采集方式:多反应监测(MRM)。

表2. 3种氯霉素类药物质谱参数

物质名称

Q1

Q3

DP/V

CE/V

氯霉素

321.0

152.1

-75

-24

256.9

-75

-17

甲砜霉素

353.9

289.9

-75

-18

184.9

-75

-28

氟苯尼考

356.0

119.0

-80

-23

184.9

-80

-12

注:“下划线”为定量离子。

结果与讨论

由表3可知,采用固相萃取结合液相色谱串联质谱的方法检测鱼肉中氯霉素、氟苯尼考和甲砜霉素,加标回收率在70% ~ 115%之间,能够满足检测要求。由图 1可知,用Venusil MP C18色谱柱检测氯霉素类药物,峰形良好,且保留时间稳定。

表3. 鱼肉中3种氯霉素类药物加标回收实验结果(添加水平1.0 µg/kg)

物质名称

保留时间/min

平均回收率/%

CV/%

氯霉素

6.78

114.3

0.4

甲砜霉素

5.18

78.2

8.9

氟苯尼考

6.51

98.4

5.0

实验谱图

图1. 0.02 µg/mL 3种氯霉素类药物混合标准溶液色谱图

结论

本实验建立了鱼肉中3种氯霉素类药物的前处理方法,并结合LC-MS/MS对样品进行了检测。 结果表明,对于加标量为4.0 µg/kg的鱼肉样品,加标回收率在70% ~ 115%之间,满足检测要求。说明该方法适用于鱼肉中氯霉素类药物的同时检测。

附:相关产品

产品名称

规格描述

包装数量

订货号

Cleanert® Silica

200 mg/3 mL

50支/包

SI2003

Venusil MP C18

3   µm,100 Å,3.0   × 50 mm

1支

VA930503-0

1.5 mL样品瓶

短螺纹透明带书写处

32   × 11.6 mm

100/pk

1109-0519

15位氮吹仪

15位

1台

NV15-G

1.5   mL样品瓶盖

9   mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色PTFE隔垫

45°Shore   A; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

尼龙针式过滤器

单膜,13   mm,0.22 µm

200个/包

AS021320

一次性注射器

2   mL无针头

100支/包

LZSQ-2ML

Qdaura® 卓睿全自动固相萃取系统

4通道

1台

SPE-40

应用编号:AF10144



  • Cleanert Silica

    Cleanert Silica 是以未键合硅胶为吸附剂的极性萃取柱。呈弱酸性,有很强的极性。用于分离非极性,弱极性化合物,油脂等,特别是结构相似的上述物质

  • Venusil MP C18

    Venusil MP C18 是一款通用型制备柱,适用于分离 极性和非极性化合物。

  • ND9(广口)

    广口短螺纹样品瓶 适配:Agilent Thermo Scientific Varian Waters etc.

  • 尼龙(Nylon通用)

    广泛的化学相容性(避强酸),良好的柔韧性 ,与大多数试剂相容,低蛋白吸附。 应用于电子、微电子、半导体工业水过滤;药液、饮料、高纯化学品的过滤

  • Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪

    Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪是针对食品、农产品、医药等行业污染物分析而设计的样品前处理设备,可以实现从活化、上样、淋洗至洗脱整个固相萃取过程的全自动化。4 萃取通道,连续处理24 个样品,通过独特的设计,实现小体积上样的同时,兼顾大体积样品中有机物、重金属、农药残留等痕量污染物的富集。

资料名称 资料形式 时间
技术方案 2016年07月12日
产品数量修改成功!
总价为:

关闭

登录

X
Email
密码
注册找回密码